鼻腔灌洗液外泌體circRNA測序

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外泌體可以調控星狀細胞(HSC)活化,鼻腔并參與HSC細胞遷移的灌洗進程。活化的液外HSC來源的外泌體中,CCN2表達升高,泌體Twist1和miR-214表達被抑制,鼻腔這些外泌體還能誘導靜止的灌洗HSC細胞表達CCN2。此外,液外Twist1可以誘導miR-214表達從而抑制CCN2的泌體表達。CCL4處理的鼻腔外泌體和外泌體SK1/S1P會誘導HSC遷移。MSC分泌的灌洗外泌體可以有效減緩肝纖維化過程,這可能成為肝纖維化治理的液外靶點。研究顯示,泌體CP-MSC來源的鼻腔外泌體miR-125b可以抑制Hedgehog信号通路的活化,抑制纖維化;而HUC-MSC分泌的灌洗外泌體可以逆轉細胞形态和TGF-β1誘導的EMT進程,減弱肝纖維化。液外有關外泌體分泌和攝取及其組成、“運載物”和相應功能的精确分子機制剛剛開始研究。鼻腔灌洗液外泌體circRNA測序

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微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平台,這些方法包括免疫親和分離、膜過濾、納米線捕獲、聲納米過濾和确定性側向位移分選等。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網絡組成的緊湊單元,能夠處理皮升到微升範圍内的黏性介質樣品;且根據特定的功能,微通道可以相互連接,使用額外的特定裝置來微調流體運動。微流控技術能夠以極高的準确性和特異性在微尺度上重現衆多實驗室過程,取代昂貴的設備,基于微流控技術的電化學外泌體檢測芯片已經受到廣fan關注。牛奶提取試劑盒價格外泌體可參與到機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化等方方面面。

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外泌體及其攜帶的組分參與肝髒細胞的增殖、再生和遷移等生理過程,在肝髒疾病和肝損傷中起着重要作用,如肝病、肝硬化、肝纖維化、酒精性脂肪肝等。抑制或阻止外泌體的分泌,或許是治理肝髒疾病的一種新型策略。此外,外泌體具有穩定性和生物安全性,也可以用作載體攜帶改造的基因或藥物,或用作疫苗誘導免疫反應殺死瘤細胞。外泌體會起到一定的保護作用,抵抗病毒的作用。與HCV類似,HBV患者的血清中分離到的外泌體同樣攜帶HBV核酸分子和蛋白質。HBV陽性的外泌體會主動轉移HBV到肝細胞中。外泌體中HBV核酸分子還會抑制RIG-1和下遊信号通路,導緻NK細胞功能紊亂。

血清中的miR-122和miR-145非常不穩定,将血清在4°C短期保存期間即發生降解,這可能是由外泌體的異質性所導緻的。–80°C保存被公認是保存各種生物标本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液适宜的保存環境,雖然這樣保存血漿可能産生含有大量“污染物”的外泌體。4°C保存雖然容易導緻外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80°C環境下,但在處理或運輸過程中有時很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍幹法以保存外泌體,在冷凍過程中使用海藻糖作為保護劑,海藻糖可以提供生物保護作用,如穩定蛋白質、細胞膜和脂質體;減少冷凍過程中冰的形成;防止蛋白質以及外泌體的聚集;減少分離和保存過程中細胞外囊泡的損失等。外泌體是細胞在特定條件下分泌的小囊泡,是細胞間傳遞信号,相互溝通和影響的重要工具。

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外泌體是新型治理劑,惡性瘤細胞往往能夠通過分泌大量外泌體抑制宿主固有免疫。對外泌體的質譜研究發現,惡性瘤細胞的外泌體含有大量活化型的表皮生長因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR),可以抑制宿主細胞α型幹擾素(IFN-α)的産生。這就解釋了為什麼部分瘤患者固有免疫低下,也為晚期病症患者的治理提供一個新的策略和理論依據。除了瘤,外泌體在其他疾病如心血管疾病等的診斷和治理的相關臨床試驗也在世界範圍内開展中。外泌體能負載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。江西CD81外泌體慢病毒包裝

在抗原呈遞細胞中的外泌體發揮作用的報道後,人們對外泌體的興趣增強。鼻腔灌洗液外泌體circRNA測序

利用蛋白質免疫印迹和酶聯免疫吸附分析技術可以對外泌體标志性蛋白質進行定性定量分析。其中蛋白免疫印迹是外泌體的經典表征手段之一,操作時往往需要細胞裂解液作為陰性對照。常用的外泌體标志性蛋白質包括四跨膜蛋白質CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2,尿液中)和凋亡誘導因子6相互作用蛋白(Alix)等,内參蛋白質可以是肌動蛋白(βActin)或甘油醛-3-磷酸脫氫酶,陰性對照蛋白可以是阻抑素(PHB,線粒體标志蛋白)或鈣聯結蛋白Calnexin。在酶聯免疫吸附析法中,外泌體裂解液通過固載有抗體的固相基質,随後與檢測抗體共孵育。兩種方法均存在操作繁瑣、耗時長的問題,相比較而言,酶聯免疫吸附分析法比蛋白質免疫印迹法更加快速,适用于高通量分析。鼻腔灌洗液外泌體circRNA測序

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