山東高效率PEI轉染試劑試用裝
準備DNA-PEI複合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的無蛋白培養基稀釋适量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊将稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿颠倒添加順序）。充分混勻後，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI複合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI複合物并輕輕渦旋培養闆/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然後滴DNA-PEI複合物。轉染3h後，添加?體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于Polysciences PEI相關内容歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公衆号：Mine-bio，回複關鍵詞“PEI申請”，即可參加！有哪些不錯的PEI轉染試劑品牌？山東高效率PEI轉染試劑試用裝
PEIMAX粉末配置方法：1)将1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃燒杯中；2)放入攪拌轉子，放置于磁力攪拌器上，設置攪拌程序以形成一個較小的漩渦；3)等待PEIMAX40K完全溶解，通常需要5分鐘左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氫氧化鈉滴定至pH6.9~7.1；5)如果不小心超過7.1，則使用1N的鹽酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1；6)将溶液轉移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L；7)用無菌真空過濾膜過濾配制的轉染試劑溶液；8)按需分裝，4°C儲存（切記不可冷凍）；注：未經配制的粉末有效期為2年。配置成液體後分裝在合适的瓶子中，并且保存在4℃的轉染試劑将可在6個月之内保持性能。如jin用于蛋白定性研究，分裝的轉染試劑可延長有效使用期至1年。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公衆号：Mine-bio，回複關鍵詞“PEI申請”，即可參加！非脂質體PEI轉染試劑試用裝可高效轉染多種類型細胞PEI MAX 是一款高度濃縮的粉劑，大量科學家選擇PEI MAX ，在内部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。
接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，将細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞彙合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI複合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的無蛋白培養基稀釋适量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊将稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿颠倒添加順序）。充分混勻後，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI複合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI複合物并輕輕渦旋培養闆/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然後滴DNA-PEI複合物。轉染1.5h後，添加½體積的包含30%血清的生長培養基。更多關于Polysciences PEI轉染試劑，歡迎咨詢曼博生物！想申請PEI試用裝，請關注我們的公衆号：Mine-bio，回複關鍵詞“PEI申請”，即可參加！
接種細胞：轉染前，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）。調整細胞濃度，将細胞鋪入細胞培養的器皿，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞彙合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI複合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的無蛋白培養基稀釋适量DNA。用同樣的培養基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊将稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿颠倒添加順序）。充分混勻後，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI複合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI複合物并輕輕渦旋培養闆/培養皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養基，替換成無血清培養基，然後滴DNA-PEI複合物。轉染1.5h後，添加½體積的包含30%血清的生長培養基。關于轉染試劑相關産品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公衆号：Mine-bio，回複關鍵詞“PEI申請”，即可參加！想購買24765-1在哪裡可以買？
對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪闆可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪闆，可适當降低鋪闆密度，以确保轉染時細胞的彙合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可适當降低鋪闆密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI複合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI複合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。更多關于PEI轉染試劑相關産品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公衆号：Mine-bio，回複關鍵詞“PEI申請”，即可參加！用PEI轉染試劑時，一般和DNA的比例是多少？非脂質體PEI轉染試劑試用裝
PEI轉染試劑是線性的好還是分支的好？山東高效率PEI轉染試劑試用裝
1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪闆可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪闆，可适當降低鋪闆密度，以确保轉染時細胞的彙合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可适當降低鋪闆密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI複合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI複合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優化。更多關于PEI轉染試劑相關産品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公衆号：Mine-bio，回複關鍵詞“PEI申請”，即可參加！山東高效率PEI轉染試劑試用裝
本文來自開封市泰達電爐科技有限公司：http://iteam365.cn/Article/67f099412.html
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